怎样能利用基因方式防治血栓形成和血管再狭窄?？
135****0328
开发者_Go百科
2021-07-13 02:57
血栓形成是急性心肌梗塞（AMI）最主要的原因,也是PTCA术后再狭窄的原因,所以预防血栓形成是防治冠心病最主要手段。Dichek等将转染t-PA基因的颈动脉内皮细胞种植在血管内支架(stenst)上,经证实在体外有高水平表达的t-PA。Eckin使用改构t-PA转染狗的隐静脉内皮细胞后,种植于stents表面,再将这种stents置人狗骼动脉,获得了防止再狭窄75%成功率。用这种方法可以将抗凝、溶栓或抑制增生药物分子种植在支架上,改善支架功能和预防再狭窄,对介入治疗和预防再发梗塞都有巨大功效。
_WeCh****608511 开发者_运维技巧 2021-07-13 03:03
构建人血栓调节蛋白(hTM)基因真核表达质粒,并导入两种真核细胞[非洲绿猴肾母细胞(COS-7细胞)和脐静脉内皮细胞(HUVECs)]中表达,为临床血栓病的基因治疗提供实验依据和物质基础.方法采用PCR法扩增hTM基因的表达片段,HindⅢ+EcoRⅠ酶切后与pcDNA3.1(+)/neo质粒连接成pcDNA3.1/hTM.经鉴定确认后,由阳离子脂质体包裹转染COS-7细胞及HUVECs,RT-PCR和免疫组化法分别检测转染后细胞hTM的mRNA及蛋白的表达.结果双酶切及测序鉴定均证实hTM基因表达片段被成功克隆,pcDNA3.1/hTM经脂质体介导能有效地转染COS-7细胞和HUVECVs.结论成功构建pcDNA3.1/hTM重组质粒,并且能在两种真核细胞中高效表达,为进一步的基因治疗和对TM抗凝机理研究提供了物质基础.
血栓形成是急性心肌梗塞（AMI）最主要的原因,也是PTCA术后再狭窄的原因,所以预防血栓形成是防治冠心病最主要手段。Dichek等将转染t-PA基因的颈动脉内皮细胞种植在血管内支架(stenst)上,经证实在体外有高水平表达的t-PA。Eckin使用改构t-PA转染狗的隐静脉内皮细胞后,种植于stents表面,再将这种stents置人狗骼动脉,获得了防止再狭窄75%成功率。用这种方法可以将抗凝、溶栓或抑制增生药物分子种植在支架上,改善支架功能和预防再狭窄,对介入治疗和预防再发梗塞都有巨大功效。
_WeCh****608511 开发者_运维技巧 2021-07-13 03:03
构建人血栓调节蛋白(hTM)基因真核表达质粒,并导入两种真核细胞[非洲绿猴肾母细胞(COS-7细胞)和脐静脉内皮细胞(HUVECs)]中表达,为临床血栓病的基因治疗提供实验依据和物质基础.方法采用PCR法扩增hTM基因的表达片段,HindⅢ+EcoRⅠ酶切后与pcDNA3.1(+)/neo质粒连接成pcDNA3.1/hTM.经鉴定确认后,由阳离子脂质体包裹转染COS-7细胞及HUVECs,RT-PCR和免疫组化法分别检测转染后细胞hTM的mRNA及蛋白的表达.结果双酶切及测序鉴定均证实hTM基因表达片段被成功克隆,pcDNA3.1/hTM经脂质体介导能有效地转染COS-7细胞和HUVECVs.结论成功构建pcDNA3.1/hTM重组质粒,并且能在两种真核细胞中高效表达,为进一步的基因治疗和对TM抗凝机理研究提供了物质基础.
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