基因敲除具体是什么？技术路线是什么？？
ty_137807881
2021-08-16 07:54
1、基因敲除（geneknockout），是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将该基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。
基因敲除除可中止某一基因的表达外，还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。
2、基因敲除的技术路线如下：
（1）构建重组基因载体﹔
（2）用电穿孔、显微注射等方法把重组DNA转入受体细胞核内﹔
（3）用选择培养基筛选已击开发者_开发百科中的细胞﹔
（4）将击中细胞转入胚胎使其生长成为转基因动物，对转基因动物进行形态观察及分子生物学检测。
M25****5741 2021-08-16 08:07
通过基因打靶技术制备基因敲除小鼠开发者_如何学JAVA模型技术路线：
根据需要构建打靶载体，然后转染到胚胎干细胞中，通过药物筛选、长距离PCR及Southern等一系列的鉴定，得到正确中靶的胚胎干细胞克隆，并注射到供体囊胚里面，发育成嵌合鼠。
将嵌合鼠与野生型的小鼠交配，如果嵌合鼠的生殖细胞是由植入的胚胎干细胞发育而成，就会将对胚胎干细胞的遗传修饰遗传给后代，从而在后代中检测到成功发生基因打靶、并且能够遗传建系的小鼠。
E76****77 开发者_C百科 2021-08-16 08:08
简单的说基因敲除是指将目标基因从基因组中删除。举一个简单的例子：比如有一段"序列":"1234567890"(原基因),敲除后为:"123 7890",一般一个敲除载体还会在其中插入一段外源基因,如"ABC",则新的基因为:"123ABC7890"；或者不插入基因直接连接，则为“1237890”。
Bl开发者_如何学运维aine银河流水 2021-08-16 08:13
基因敲除是将细胞基因组中某基因去除或使基因失去活性的技术。去除原核生物细胞、真核生物的生殖细胞、体细胞或干细胞基因组中的基因等。广义的基因敲除包括某个或某些基因的完全敲除、部分敲除、基因调控序列的敲除以及成段基因组序列的敲除。常用同源重组的方法。敲除的基因用以观察生物或细胞的表型变化，是研究基因功能的重要手段。
1、基因敲除（geneknockout），是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将该基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。
基因敲除除可中止某一基因的表达外，还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。
2、基因敲除的技术路线如下：
（1）构建重组基因载体﹔
（2）用电穿孔、显微注射等方法把重组DNA转入受体细胞核内﹔
（3）用选择培养基筛选已击开发者_开发百科中的细胞﹔
（4）将击中细胞转入胚胎使其生长成为转基因动物，对转基因动物进行形态观察及分子生物学检测。
M25****5741 2021-08-16 08:07
通过基因打靶技术制备基因敲除小鼠开发者_如何学JAVA模型技术路线：
根据需要构建打靶载体，然后转染到胚胎干细胞中，通过药物筛选、长距离PCR及Southern等一系列的鉴定，得到正确中靶的胚胎干细胞克隆，并注射到供体囊胚里面，发育成嵌合鼠。
将嵌合鼠与野生型的小鼠交配，如果嵌合鼠的生殖细胞是由植入的胚胎干细胞发育而成，就会将对胚胎干细胞的遗传修饰遗传给后代，从而在后代中检测到成功发生基因打靶、并且能够遗传建系的小鼠。
E76****77 开发者_C百科 2021-08-16 08:08
简单的说基因敲除是指将目标基因从基因组中删除。举一个简单的例子：比如有一段"序列":"1234567890"(原基因),敲除后为:"123 7890",一般一个敲除载体还会在其中插入一段外源基因,如"ABC",则新的基因为:"123ABC7890"；或者不插入基因直接连接，则为“1237890”。
Bl开发者_如何学运维aine银河流水 2021-08-16 08:13
基因敲除是将细胞基因组中某基因去除或使基因失去活性的技术。去除原核生物细胞、真核生物的生殖细胞、体细胞或干细胞基因组中的基因等。广义的基因敲除包括某个或某些基因的完全敲除、部分敲除、基因调控序列的敲除以及成段基因组序列的敲除。常用同源重组的方法。敲除的基因用以观察生物或细胞的表型变化，是研究基因功能的重要手段。
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