研发基因药物的mRNA靶点是怎么确认的??
由于RNaseH降解mRNA的机制在体外及体内反义效应中均起重要作用,因而使用RNaseH酶切体外作图分析,作为一种筛选策略非常有意义.在体外,为了验证通过筛选技术获得的位点而设计的反义寡核苷酸,需要分析寡核苷酸介导RNaseH对mRNA的切割作用。在细胞内,也可将反义核酸导入培养细胞或实验动物体内进行试验,分析基因表达受到抑制的效果,来验证和判断.在这些试验中,应该严格设立两种对照组:一、同一基因非靶位点(未被筛选的序列)的一段反义链序列作为组间阴性对照;二、筛选获得的位点反义序列通过人工突变2~4碱基作为组内阴性对照。
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