测囊泡DNA是更灵敏的无创产前诊断方法吗？？
D15****020
2021-10-06 06:55
在基于高通量测序的无创产前诊断中，科学家为了提高检测准确性、并节省测序成本，想了许多办法。
检测囊泡DNA是一种新的大幅提高检测准确性的手段。这种方法开发者_如何学运维的原理是：
在怀孕2~3月龄时，母亲血液中约50%的囊泡是来自胎儿的。来自胎儿的囊泡中几乎是纯的胎儿DNA
相比于血浆游离DNA中胎儿DNA占5~10%的比例，所有囊泡DNA中胎儿DNA的占比要高得多
针对胎儿染色体异常，对囊泡DNA进行测序，相对于测血浆游离DNA，检出灵敏度会高许多
我就是来八卦的Q 2021-10-06 07:11
检测囊泡DNA确实能够大幅提高检测的准确性。其方法大概可以概括为，取得血清后，用DNase酶进行处理，DNase无法进入囊泡，只能消化掉囊泡外的游离DNA。囊泡内的DNA得以保存。再用Proteinase K蛋白消化酶处理，蛋白酶把DNase消化掉用苯酚/氯仿处理，把所有的蛋白（包括Proteinase K)变性破坏掉，同时也把囊泡的膜破掉，囊泡中的DNA释放出来。水相用乙醇/异丙醇沉淀回收DNA，对回收的DNA进行高通量测序（也可以考虑用DD-PCR或其开发者_JAVA技巧它方法进行定量检测）。检测片段大小在200bp左右的血浆游离DNA，因为只有小片段的DNA才更易透过母亲与胎儿之间的胎盘屏障，进入母亲的血液中，所以母血中小片段（200bp)中，胎儿的DNA的占比会高，通过电泳/柱回收等手段，提取小片段DNA进行高通量测序。这一方法已被多家实验室采用。相关文献: http://www.clinchem.org/content/50/6/1002.short。
在基于高通量测序的无创产前诊断中，科学家为了提高检测准确性、并节省测序成本，想了许多办法。
检测囊泡DNA是一种新的大幅提高检测准确性的手段。这种方法开发者_如何学运维的原理是：
在怀孕2~3月龄时，母亲血液中约50%的囊泡是来自胎儿的。来自胎儿的囊泡中几乎是纯的胎儿DNA
相比于血浆游离DNA中胎儿DNA占5~10%的比例，所有囊泡DNA中胎儿DNA的占比要高得多
针对胎儿染色体异常，对囊泡DNA进行测序，相对于测血浆游离DNA，检出灵敏度会高许多
我就是来八卦的Q 2021-10-06 07:11
检测囊泡DNA确实能够大幅提高检测的准确性。其方法大概可以概括为，取得血清后，用DNase酶进行处理，DNase无法进入囊泡，只能消化掉囊泡外的游离DNA。囊泡内的DNA得以保存。再用Proteinase K蛋白消化酶处理，蛋白酶把DNase消化掉用苯酚/氯仿处理，把所有的蛋白（包括Proteinase K)变性破坏掉，同时也把囊泡的膜破掉，囊泡中的DNA释放出来。水相用乙醇/异丙醇沉淀回收DNA，对回收的DNA进行高通量测序（也可以考虑用DD-PCR或其开发者_JAVA技巧它方法进行定量检测）。检测片段大小在200bp左右的血浆游离DNA，因为只有小片段的DNA才更易透过母亲与胎儿之间的胎盘屏障，进入母亲的血液中，所以母血中小片段（200bp)中，胎儿的DNA的占比会高，通过电泳/柱回收等手段，提取小片段DNA进行高通量测序。这一方法已被多家实验室采用。相关文献: http://www.clinchem.org/content/50/6/1002.short。
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