如何从产品中检测其是否含有转基因产物呢？？
killer9300q
2021-10-31 03:45
为使开发者_开发技巧外源基因在导入植物中高效表达且易于筛选，在构建表达载体的时候常加上能在植物细胞中表达的各种启动子、终止子和标记基因。据统计，有80%～90%商业化转基因作物使用了CaMV35S、FMV35S启动子，90%以上的转基因作物使用了NOS终止子与NPTⅡ标记基因。在转基因玉米、大豆、油菜中使用比较广泛的抗虫基因是Cry1A(b)，抗除草剂基因EPSPS和PAT。因此可以检测材料中是否含有外源启动子、终止子、标记基因、目的基因及其表达产物来判断是否含有转基因成分。
检测方法主要有:
1、外源蛋白质检测
蛋白质检测是利用免疫化学原理，将外源基因表达的蛋白质制备抗体，根据抗原抗体特异性结合和酶对底物的高效催化的原理，从而达到检测目标蛋白的目的。主要有酶联免疫吸附法(Enzymelinked immunosorbent assay，ELISA)、试纸条，以及Western杂交技术等。其中，ELISA试剂盒是到目前为止转基因检测系列产品最成熟的商业化试剂盒产品，检测灵敏度高于0.1%，具有可定量分析、操作简单、易自动化等优点。而试纸条法检测表达蛋白的最低值可达到0.15%，且简单、快速、易操作，可随身携带。目前已开发出针对检测抗除草剂的莽草酸羟基乙酰转移酶(EPSPS)、草丁膦乙酰转移酶(PAT)以及抗虫的Bt毒蛋白(CrylAc，CrylC，Cry3A，Cry2A，Cry9C编码产物)等多种商业化检测试剂盒和试纸条出售。
Western杂交是植物基因工程中检测外源基因是否表达出蛋白质的权威方法。但该方法需要转膜及杂交，操作繁琐且费用高，不适合大批量样品的检测。
由于外源基因的表达有组织特异性，对一些诱导型基因表达的蛋白质在特定的材料中无法检测；而且因为蛋白质容易在加工过程中变性，因此不适用于深加工产品的检测，只适用于原材料和浅加工产品的检测；需要制备特异的抗体，制备过程繁琐。这些因素都极大的限制了其在转基因检测方面的应用。
2、 外源DNA检测
主要有分子杂交技术和PCR技术。分子杂交技术主要包括Southern和Northern杂交，分别从整合、转录水平检测外源基因的行为，准确度高、特异性强，但需要转膜及杂交，操作繁琐、费用高，不适合大批量样品的检测，一般仅用于对PCR结果的验证。
PCR(Polymerase Chain Reaction)技术，是目前转基因检测中应用最广泛的技术，具有快速、简便、灵敏等诸多优点。
3、基因芯片(Gene chip)技术
在转基因检测中，将目前通用的报告基因、抗生素抗性标记基因、启动子和终止子的特异片断制成检测芯片与待测产品的DNA进行杂交，杂交信号由扫描仪扫描后再经计算机软件进行分析，就可以判断待测样品是否为转基因产品。 Serge Leimanis等建立了同时对Btll、Starlink、MON810、GA21、T25、T45、Topasl9/2和转基因大豆9种转基因作物的CaMV35S、NOS终止子、NPTⅡ标记基因3种元件进行检测的基因芯片技术，经5个实验室测试，检测灵敏度可达0.1%～0.3%。基因芯片技术具有高通量、灵敏度高、特异性强、假阳性率和假阴性率低、操作简便、自动化程度高等特点，是一种在转基因检测中极有发展前景和应用价值的技术，也是近年来国内外研究的热点。
4、近红外光谱扫描技术、色谱技术：
针对转基因作物中如蛋白质含量、氨基酸组成、油分含量以及纤维结构等的改变，可采用近红外光谱扫描技术、色谱技术进行检测，该方法具有操作简单、成本低、无污染、快速、高效的特点。
青爷丶 2021-10-31 03:58
目前转基因的检测方法转基因作物检测方法大体分为两种：一是检测是否含有外源蛋白，即外源基因表达产物，主要采用酶联免开发者_StackOverflow中文版疫吸附法和试纸条法；二是检测是否含有外源基因(DNA)，主要有Southern杂交技术、基因芯片法和PCR检测法。
理论上来说，以上所介绍的转基因检测方法，只要改变相应的检测靶标，都可检测不同的转基因产品。但是实际应用中，以检测外源蛋白的转基因检测方法存大很大的局限性，食品的复杂成分会干扰检测效果，并且加工过的转基因食品中的蛋白质抗原性很容易受破坏，从而会影响检测结果的灵敏度。
目前，所有商业化的转基因食品都有相应的PCR检测方法标准。
Carzy 2021-10-31 04:07 开发者_开发知识库
一般而言，单纯从食品的外观和营养成分，一般无法区分转基因食品与非转基因食品。目前，科学界主要是从分子水平检测样品中有没有外来的基因和蛋白，进而确定是否含有转基因成分。
想我们实验室里，主要是将样品的DNA提取出来，通过PCR方法进行筛查，检测其中是否含有转入的基因，进行转基因操作时，有很多通用的调控原件，如启动子和终止子等，这些调控原件在大部分转基因产品中是通用的，我们可以进行初步筛查。一旦检测到这些原件的存在，则意味着它很可能是转基因食物，之后会进一步分析转进去的是什么样的基因”。
另外补充一下一些其他的方法。
为使开发者_开发技巧外源基因在导入植物中高效表达且易于筛选，在构建表达载体的时候常加上能在植物细胞中表达的各种启动子、终止子和标记基因。据统计，有80%～90%商业化转基因作物使用了CaMV35S、FMV35S启动子，90%以上的转基因作物使用了NOS终止子与NPTⅡ标记基因。在转基因玉米、大豆、油菜中使用比较广泛的抗虫基因是Cry1A(b)，抗除草剂基因EPSPS和PAT。因此可以检测材料中是否含有外源启动子、终止子、标记基因、目的基因及其表达产物来判断是否含有转基因成分。
检测方法主要有:
1、外源蛋白质检测
蛋白质检测是利用免疫化学原理，将外源基因表达的蛋白质制备抗体，根据抗原抗体特异性结合和酶对底物的高效催化的原理，从而达到检测目标蛋白的目的。主要有酶联免疫吸附法(Enzymelinked immunosorbent assay，ELISA)、试纸条，以及Western杂交技术等。其中，ELISA试剂盒是到目前为止转基因检测系列产品最成熟的商业化试剂盒产品，检测灵敏度高于0.1%，具有可定量分析、操作简单、易自动化等优点。而试纸条法检测表达蛋白的最低值可达到0.15%，且简单、快速、易操作，可随身携带。目前已开发出针对检测抗除草剂的莽草酸羟基乙酰转移酶(EPSPS)、草丁膦乙酰转移酶(PAT)以及抗虫的Bt毒蛋白(CrylAc，CrylC，Cry3A，Cry2A，Cry9C编码产物)等多种商业化检测试剂盒和试纸条出售。
Western杂交是植物基因工程中检测外源基因是否表达出蛋白质的权威方法。但该方法需要转膜及杂交，操作繁琐且费用高，不适合大批量样品的检测。
由于外源基因的表达有组织特异性，对一些诱导型基因表达的蛋白质在特定的材料中无法检测；而且因为蛋白质容易在加工过程中变性，因此不适用于深加工产品的检测，只适用于原材料和浅加工产品的检测；需要制备特异的抗体，制备过程繁琐。这些因素都极大的限制了其在转基因检测方面的应用。
2、 外源DNA检测
主要有分子杂交技术和PCR技术。分子杂交技术主要包括Southern和Northern杂交，分别从整合、转录水平检测外源基因的行为，准确度高、特异性强，但需要转膜及杂交，操作繁琐、费用高，不适合大批量样品的检测，一般仅用于对PCR结果的验证。
PCR(Polymerase Chain Reaction)技术，是目前转基因检测中应用最广泛的技术，具有快速、简便、灵敏等诸多优点。
3、基因芯片(Gene chip)技术
在转基因检测中，将目前通用的报告基因、抗生素抗性标记基因、启动子和终止子的特异片断制成检测芯片与待测产品的DNA进行杂交，杂交信号由扫描仪扫描后再经计算机软件进行分析，就可以判断待测样品是否为转基因产品。 Serge Leimanis等建立了同时对Btll、Starlink、MON810、GA21、T25、T45、Topasl9/2和转基因大豆9种转基因作物的CaMV35S、NOS终止子、NPTⅡ标记基因3种元件进行检测的基因芯片技术，经5个实验室测试，检测灵敏度可达0.1%～0.3%。基因芯片技术具有高通量、灵敏度高、特异性强、假阳性率和假阴性率低、操作简便、自动化程度高等特点，是一种在转基因检测中极有发展前景和应用价值的技术，也是近年来国内外研究的热点。
4、近红外光谱扫描技术、色谱技术：
针对转基因作物中如蛋白质含量、氨基酸组成、油分含量以及纤维结构等的改变，可采用近红外光谱扫描技术、色谱技术进行检测，该方法具有操作简单、成本低、无污染、快速、高效的特点。
青爷丶 2021-10-31 03:58
目前转基因的检测方法转基因作物检测方法大体分为两种：一是检测是否含有外源蛋白，即外源基因表达产物，主要采用酶联免开发者_StackOverflow中文版疫吸附法和试纸条法；二是检测是否含有外源基因(DNA)，主要有Southern杂交技术、基因芯片法和PCR检测法。
理论上来说，以上所介绍的转基因检测方法，只要改变相应的检测靶标，都可检测不同的转基因产品。但是实际应用中，以检测外源蛋白的转基因检测方法存大很大的局限性，食品的复杂成分会干扰检测效果，并且加工过的转基因食品中的蛋白质抗原性很容易受破坏，从而会影响检测结果的灵敏度。
目前，所有商业化的转基因食品都有相应的PCR检测方法标准。
Carzy 2021-10-31 04:07 开发者_开发知识库
一般而言，单纯从食品的外观和营养成分，一般无法区分转基因食品与非转基因食品。目前，科学界主要是从分子水平检测样品中有没有外来的基因和蛋白，进而确定是否含有转基因成分。
想我们实验室里，主要是将样品的DNA提取出来，通过PCR方法进行筛查，检测其中是否含有转入的基因，进行转基因操作时，有很多通用的调控原件，如启动子和终止子等，这些调控原件在大部分转基因产品中是通用的，我们可以进行初步筛查。一旦检测到这些原件的存在，则意味着它很可能是转基因食物，之后会进一步分析转进去的是什么样的基因”。
另外补充一下一些其他的方法。
据了解，目前，除了实验室的PCR检测方法外，还有一些公司开发出简便的转基因检测手段，例如用于蛋白质检测的试纸条。以玉米粉为例，将其用水冲泡，并把试纸插入浸泡液中，根据试纸显示的条带就可以测出是否含有转基因成分。此外，在田间检查时，将农作物的叶子摘下来，挤出汁液并滴在试纸条上，也能检测转基因成分。
“但对于深加工食品，试纸条检测方法就不太适用，因为加工处理会影响检测的效果”，检测人员说，对转基因作物进行加工的手段，会影响人们对转基因成分的测试，“例如我们吃的大豆油，在压榨和精炼的过程中就已经把DNA和蛋白质都去除掉了。这个时候要证明它是转基因的很困难”。
加载中,请稍侯......
精彩评论