如何应用多基因转化策略综合改良生物体遗传性研究方向？？
ly1987526
2021-11-08 22:39
问题太宽泛了，简要说一下目前多基因转化在技术上面临的问题：
多基因改良策略虽然具有许多至今尚无法准确评估的优点,但就象其他新生的技术一样,它也存在着许多技术上迫切需要进一步解决的问题。根据我们的初步实践,我们认为:①在生物的遗传改良中,并不一定是基因愈多,亲缘关系愈远愈好,必须根据基因工程的目的开发者_JAVA百科来确定选用那些基因和用多少个基因;②应进一步大力开展功能基因组的研究,克隆出更多有实用价值的功能基因以作为今后发展的基础;③进一步改进多基因转化技术的细节,如更好的多基因表达载体的构建,更有效的多基因转化方法的建立,定点整合技术的建立以及寻找更多样化的启动子等;④虽然应用低等生物的基因改良高等生物的遗传性没有翻译后加工的障碍,但当将高等生物基因应用于相对较低等生物的改良时,其翻译后的加工往往可能会出现障碍。而多个基因在同一个转基因植株中的转录和表达水平往往也不一致。这一难点涉及蛋白质组学和NRA组学,人类至今了解尚少,因此有待于蛋白质组学和RNA组学的发展和配合,才能找到解决的方法;⑤应用多基因改良生物体有可能带来更为复杂的环境生态问题以及食品安全性问题,因此必须发展无标记基因技术及功能基因的特异性表达技术等。相信只要我们认真对待和深人研究,这些问题终将会获得解决。
ln11202 2021-11-08 22:42
植物多基因转化在修饰植物多基因代谢途径和获得无选择标记转基因植株研究中具有巨大应用潜力。
1 农杆菌介导烟草多基因转化
烟草是转基冈研究的模式植物之一，也是最先利用农杆菌介导法转化成功的植物。因此，烟草多基因转化开展较早，研究相对深入。利用农杆菌对烟草进行多基因转化主要分为一次转化法和多次转化法两种类型。
2 水稻多基因转化
水稻是世界上最主要的粮食作物和单子叶植物的模式植物。自1991年Christou等首先以基因枪法转化水稻幼胚、1994年Hiei等建立农杆菌介导法转化粳稻的方法以来，水稻遗传转化研究越来越广泛和深入，包括品质改良、抗虫育种和抗病育种等，在建立水稻规模化转基因技术体系的同时，也在尝试多基因转化。
玉米是是界上分布最广泛的粮食作物之一，是全球重要的饲料、粮食作物和工业原料，其多基因转化研究工作也已开始。
3.玉米多基因转化
Zhu等曾将Zmpsy1、Pacrt1、Gllycbb、Glbch、ParacrrtW等5个类胡萝卜素合成相关基因和筛选标记bar基因构建于不同载体上，利用基因枪介导法将这6个由不同启动子调控的基因转化缺乏类胡萝卜素的玉米品种M37W的幼胚，PCR检证实13%的转基因植株含有所转化的5个功能基因，所有转基因植株生长发育正常，胚乳中出现7种表现型。另一项相关研究利用β－类胡萝卜素、抗坏血酸和叶酸代谢途径中相关酶的编码基因Psy1、crtI、dhar和fdlE分别构建表达载体，其中，psy1基因由小麦低分子量麦谷蛋白启动子控制，crt I、dhar和falE由大麦醇溶蛋白启动子调控，利用基因枪法转化M37W幼胚，PCR检测证实75株阳性植株中含有全部5个基因，Noethern杂交显示4个代谢相关基因在转基因植株中的表达水平较高。
4 其他植物多基因转化
除烟草、水稻和玉米外，其他植物也有多基因转化的成功报道。Schmi开发者_如何学编程dt等利用基因枪法将gfp、npt、ble、gusA、bar和npt共6个基因同时转化大豆愈伤组织，设计了3种转化策略，包括单质粒(6个基因构建在同一个载体上)共转化、多质粒(其中bar基因和npt基因在一个质粒上，其他4个基因分别位于不同质粒上)等体积混合共转化和多质粒非等体积混合共转化(bar基因和hpt基因所在的质粒与其他质粒体积比为9:1)。对T0。代的PCR和Southern杂交分析显示，在单质粒共转化检测的7株转基因植株中，hpt、gfp和nptⅡ基因的转化效率较高，体积比为1:1的4株共转化植株中ble基因沉默的较多，而1:9体积比的共转化只检测到1株阳性植株，其中ble基因沉默，表明不同转化策略导致了不同基因的缺失或沉默。
lambland 2021-11-08 22:50 开发者_开发知识库
利用多基因转化策略改良生物体遗传性方面已经有一些研究进展，一般可采用的策略和方法有：
1、重复转化法（顺序转化法）
2、杂交聚合法
3、直接转化法与回交转育法结合
4、非载体DNA转移途径导入外源整体DNA
5、多载体的共转化法
6、多基因单载体一次性转化法
7、利用同源重组将多个基因同时导入质体中，即质体转化法。
具体内容可以参见论文——《论应用多基因转化策略综合改良生物体遗传性研究方向的前景》。
问题太宽泛了，简要说一下目前多基因转化在技术上面临的问题：
多基因改良策略虽然具有许多至今尚无法准确评估的优点,但就象其他新生的技术一样,它也存在着许多技术上迫切需要进一步解决的问题。根据我们的初步实践,我们认为:①在生物的遗传改良中,并不一定是基因愈多,亲缘关系愈远愈好,必须根据基因工程的目的开发者_JAVA百科来确定选用那些基因和用多少个基因;②应进一步大力开展功能基因组的研究,克隆出更多有实用价值的功能基因以作为今后发展的基础;③进一步改进多基因转化技术的细节,如更好的多基因表达载体的构建,更有效的多基因转化方法的建立,定点整合技术的建立以及寻找更多样化的启动子等;④虽然应用低等生物的基因改良高等生物的遗传性没有翻译后加工的障碍,但当将高等生物基因应用于相对较低等生物的改良时,其翻译后的加工往往可能会出现障碍。而多个基因在同一个转基因植株中的转录和表达水平往往也不一致。这一难点涉及蛋白质组学和NRA组学,人类至今了解尚少,因此有待于蛋白质组学和RNA组学的发展和配合,才能找到解决的方法;⑤应用多基因改良生物体有可能带来更为复杂的环境生态问题以及食品安全性问题,因此必须发展无标记基因技术及功能基因的特异性表达技术等。相信只要我们认真对待和深人研究,这些问题终将会获得解决。
ln11202 2021-11-08 22:42
植物多基因转化在修饰植物多基因代谢途径和获得无选择标记转基因植株研究中具有巨大应用潜力。
1 农杆菌介导烟草多基因转化
烟草是转基冈研究的模式植物之一，也是最先利用农杆菌介导法转化成功的植物。因此，烟草多基因转化开展较早，研究相对深入。利用农杆菌对烟草进行多基因转化主要分为一次转化法和多次转化法两种类型。
2 水稻多基因转化
水稻是世界上最主要的粮食作物和单子叶植物的模式植物。自1991年Christou等首先以基因枪法转化水稻幼胚、1994年Hiei等建立农杆菌介导法转化粳稻的方法以来，水稻遗传转化研究越来越广泛和深入，包括品质改良、抗虫育种和抗病育种等，在建立水稻规模化转基因技术体系的同时，也在尝试多基因转化。
玉米是是界上分布最广泛的粮食作物之一，是全球重要的饲料、粮食作物和工业原料，其多基因转化研究工作也已开始。
3.玉米多基因转化
Zhu等曾将Zmpsy1、Pacrt1、Gllycbb、Glbch、ParacrrtW等5个类胡萝卜素合成相关基因和筛选标记bar基因构建于不同载体上，利用基因枪介导法将这6个由不同启动子调控的基因转化缺乏类胡萝卜素的玉米品种M37W的幼胚，PCR检证实13%的转基因植株含有所转化的5个功能基因，所有转基因植株生长发育正常，胚乳中出现7种表现型。另一项相关研究利用β－类胡萝卜素、抗坏血酸和叶酸代谢途径中相关酶的编码基因Psy1、crtI、dhar和fdlE分别构建表达载体，其中，psy1基因由小麦低分子量麦谷蛋白启动子控制，crt I、dhar和falE由大麦醇溶蛋白启动子调控，利用基因枪法转化M37W幼胚，PCR检测证实75株阳性植株中含有全部5个基因，Noethern杂交显示4个代谢相关基因在转基因植株中的表达水平较高。
4 其他植物多基因转化
除烟草、水稻和玉米外，其他植物也有多基因转化的成功报道。Schmi开发者_如何学编程dt等利用基因枪法将gfp、npt、ble、gusA、bar和npt共6个基因同时转化大豆愈伤组织，设计了3种转化策略，包括单质粒(6个基因构建在同一个载体上)共转化、多质粒(其中bar基因和npt基因在一个质粒上，其他4个基因分别位于不同质粒上)等体积混合共转化和多质粒非等体积混合共转化(bar基因和hpt基因所在的质粒与其他质粒体积比为9:1)。对T0。代的PCR和Southern杂交分析显示，在单质粒共转化检测的7株转基因植株中，hpt、gfp和nptⅡ基因的转化效率较高，体积比为1:1的4株共转化植株中ble基因沉默的较多，而1:9体积比的共转化只检测到1株阳性植株，其中ble基因沉默，表明不同转化策略导致了不同基因的缺失或沉默。
lambland 2021-11-08 22:50 开发者_开发知识库
利用多基因转化策略改良生物体遗传性方面已经有一些研究进展，一般可采用的策略和方法有：
1、重复转化法（顺序转化法）
2、杂交聚合法
3、直接转化法与回交转育法结合
4、非载体DNA转移途径导入外源整体DNA
5、多载体的共转化法
6、多基因单载体一次性转化法
7、利用同源重组将多个基因同时导入质体中，即质体转化法。
具体内容可以参见论文——《论应用多基因转化策略综合改良生物体遗传性研究方向的前景》。
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