高度保守的两个基因，如何做qPCR？？
孟宪羽
2021-06-06 03:42
开发者_如何学C
可以先做blast，分析出有非同源的位点，再设计引物。设计好以后再在NCBI上做个primer-blast看一下特异性。设计p16ink4a和p19arf的引物时，我先看表达这两个基因的不同exon，再在不同的exon上设计引物，得到的引物特异性就很好。
天下第六 开发者_开发技巧 2021-06-06 03:52
对于高度保守的两个基因来说肯定会有不相同的碱基，设计引物的时候将引物设计在两个基因的差异序列那里，然后再进行荧光定量PCR，如果两个基因特别相近，就多设计几对引物先跑个基本的PCR，要是一条能扩增另一条不能的话估计应该能行。
可以先做blast，分析出有非同源的位点，再设计引物。设计好以后再在NCBI上做个primer-blast看一下特异性。设计p16ink4a和p19arf的引物时，我先看表达这两个基因的不同exon，再在不同的exon上设计引物，得到的引物特异性就很好。
天下第六 开发者_开发技巧 2021-06-06 03:52
对于高度保守的两个基因来说肯定会有不相同的碱基，设计引物的时候将引物设计在两个基因的差异序列那里，然后再进行荧光定量PCR，如果两个基因特别相近，就多设计几对引物先跑个基本的PCR，要是一条能扩增另一条不能的话估计应该能行。
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